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硫胺素焦磷酸和磷酸吡哆醛的 HPLC 分離
研究發(fā)現(xiàn),血液中硫胺素焦磷酸和磷酸吡哆醛的水平與阿爾茨海默病相關(guān)聯(lián)。
由于復(fù)雜的樣品制備以及傳統(tǒng) C18 色譜柱無(wú)法獲得保留,使用離子對(duì)試劑的方法又不能和質(zhì)譜檢測(cè)器兼容,這使得血液中這兩種化合物的 LC/MS 分析成為一項(xiàng)極富挑戰(zhàn)的工作。
SIELC 開(kāi)發(fā)了一種LC/MS 方法,采用 SIELC 公司的Primesep SB 反相陰離子交換色譜柱, 使用簡(jiǎn)單的流動(dòng)相梯度,這兩種化合物既能獲得良好的保留和分離。
生物流體中其它的極性酸性化合物,現(xiàn)在,也可以采用這種方法來(lái)進(jìn)行分析。
色譜柱:Primesep SB 5μm 50×4.6mm(貨號(hào):SB-46.050.0510)
流動(dòng)相:
A:50mL 乙腈 + 250mL 0.2%甲酸溶液 + 700mL 水
B:200mL 乙腈 + 500mL 1.6%甲酸溶液 + 300mL 水
梯度:
時(shí)間/min |
流動(dòng)相 A/% |
流動(dòng)相 B/% |
0 |
100 |
0 |
3 |
0 |
100 |
6 |
0 |
100 |
流速:1ml/min
檢測(cè)波長(zhǎng):290nm