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進(jìn)出口食品中羅丹明 B 的檢測的固相萃取方法
（SuperClean AL-N）
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?
本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC 法作為檢測手段。該方法可簡化樣品的前處理過程，節(jié)省有機(jī)溶劑的使用，操作簡便。
二、實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)物
羅丹明 B(CAS:81-88-9)
三、應(yīng)用范圍
本方法適用于進(jìn)出口食品中羅丹明B 的檢測的HPLC 檢測及確證。
四、參考標(biāo)準(zhǔn)
《SN/T 2430-2010 進(jìn)出口食品中羅丹明 B 的檢測方法》
五、實(shí)驗(yàn)材料
NuAnalytical SuperClean AL-N 中性氧化鋁固相萃取柱 1g/6mL。
六、實(shí)驗(yàn)方法
1、 樣品待測溶液制備
稱取辣椒粉 2 g（精確至 0.01）于 50 mL 離心管中，準(zhǔn)確加入 20 mL 20%丙酮正己烷，于渦旋混勻器上混合提取 2 min，再超聲提取 15 min，于 4000 r/min 離心 5 min，上清液過濾待凈化。
2、活化
依次用 6 mL 正己烷活化。
3、上樣和洗脫
取待凈化液 10 mL 加入中性氧化鋁小柱，1 滴/秒流速通過中性氧化鋁小柱后，棄去溶液，加入 10 mL 丙酮-正己烷溶液(20:80, v/v)淋洗，棄去淋洗液，抽干小柱。取 10 mL 2%氨水甲醇溶液洗脫小柱，收集洗脫液，洗脫液于 50 ℃氮吹至干。
4、重新溶解
用 1 mL 甲醇定容，0.22μm 微孔濾膜過濾，供HPLC 測定。
5、HPLC 條件
色譜柱：SuperLu C18 (250×4.6mm，5μm)
檢測器：Waters 2475 熒光檢測器，λex=550 nm，λem=580 nm
流動(dòng)相：A:水 B:甲醇
洗脫方式： 等度洗脫，A:B=25 : 75
柱溫：室溫
流速：1.0 mL/min
進(jìn)樣量：20μL
七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1、 25μg/kg 辣椒粉中羅丹明B 的添加回收結(jié)果
表 1 25μg/kg 辣椒粉中羅丹明 B 的添加回收結(jié)果回收率（%）
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2、添加水平為 25μg/kg 辣椒粉中羅丹明B 檢測色譜圖
圖1 添加水平為25μg/kg辣椒粉中羅丹明B檢測色譜圖
