液質(液相色譜-質譜聯用技術,LC-MS)靈敏度的提升是一個涉及多個方面的復雜過程。以下是一些關鍵措施,用于提高液質的靈敏度:
### 1. 樣品處理與優(yōu)化
* **使用超純溶劑和試劑**:確保所有溶劑和試劑均為MS級,以減少背景噪聲和信號抑制。常用的溶劑包括水(如Milli-Q®超純水)、乙腈、甲醇等。
* **樣品前處理**:對于含鹽量較高的樣品,如食物、體液或組織,建議使用固相萃取(SPE)進行脫鹽處理,以減少離子抑制和質譜儀污染。
* **避免使用非揮發(fā)性緩沖液**:非揮發(fā)性緩沖液(如硫酸鹽、磷酸鹽、硼酸鹽)會導致離子源沉淀,影響靈敏度。應使用揮發(fā)性緩沖液,如甲酸銨或乙酸銨。
### 2. 儀器設置與優(yōu)化
* **色譜柱選擇**:選用高質量的色譜柱,并避免使用可能導致色譜柱塌陷的酸性條件。同時,應定期清洗色譜柱以減少污染。
* **系統死體積最小化**:最大限度地減少從進樣器到檢測器單元的系統部件體積(不包括色譜柱體積),以減少色譜峰變寬、拖尾或分叉,從而提高分辨率和靈敏度。
* **泵入口過濾器維護**:定期更換泵入口過濾器,以降低基線噪音并保護系統和色譜柱。
### 3. 質譜操作模式與參數優(yōu)化
* **全掃描、母離子及子離子掃描**:通過全掃描模式確定母離子質量數,然后利用子離子掃描模式進一步確證子離子質量數。這種方法可以提高對化合物的識別能力,從而間接提高靈敏度。
* **優(yōu)化錐孔電壓和碰撞能量**:這些參數對離子的傳輸效率和碎片化效率有重要影響,應根據具體化合物進行優(yōu)化。
* **采用高靈敏度檢測模式**:如選擇性離子監(jiān)測(SIM)或反應監(jiān)測(RM)模式,這些模式可以針對特定質量數的離子進行檢測,從而提高信噪比和靈敏度。
### 4. 其他注意事項
* **避免污染**:在整個樣品處理和分析過程中,應嚴格避免污染。例如,使用原裝瓶儲存溶劑,避免使用塑料裝置等。
* **儀器維護與保養(yǎng)**:定期對儀器進行維護和保養(yǎng),如清洗離子源、調諧質譜儀等,以確保儀器處于最佳工作狀態(tài)。
綜上所述,提高液質靈敏度的關鍵在于樣品處理與優(yōu)化、儀器設置與優(yōu)化、質譜操作模式與參數優(yōu)化以及避免污染等方面。通過綜合運用這些措施,可以顯著提高液質分析的靈敏度和準確性。