摘要:目的 結(jié)合外標(biāo)法和面積歸一化法,建立反相高效液相色譜法測(cè)定Fmoc-L-His(Trt)-OH 中的光學(xué)異構(gòu)體Fmoc-D-His(Trt)-OH 的含量。
方法 采用Chiral MX(2)-RH 色譜柱(4.6 mm×250mm,5 μm);以乙腈- 水- 乙酸(500∶500∶1)為流動(dòng)相,等度洗脫;流速為0.8 mL·min- 1;紫外檢測(cè)器檢測(cè),波長(zhǎng)為220 nm;柱溫為30 ℃;進(jìn)樣體積為10 μL。結(jié)果 Fmoc-L-His(Trt)-OH 和
Fmoc-D-His(Trt)-OH 分離良好;Fmoc-D-His(Trt)-OH 在0.15 ~ 2.93 mg·mL- 1 與峰面積呈良好的線性關(guān)系(相關(guān)系數(shù)為0.9999);定量限為0.15 μg·mL- 1,檢測(cè)限為0.049 μg·mL- 1。回收率在95% ~ 100% 內(nèi),RSD 為0.96%。結(jié)論 本方法操作簡(jiǎn)單,專屬性強(qiáng),靈敏度高,為Fmoc-L-His(Trt)-OH 中光學(xué)異構(gòu)體Fmoc-D-His(Trt)-OH 研究提供參考。