液相色譜法定量的依據(jù)是被測(cè)組分的量(W)與響應(yīng)值(A)(峰高或峰面積)成正比,即W=f×A。
其中,定量校正因子(f)是定量計(jì)算公式的比例常數(shù),其物理意義是單位響應(yīng)值(峰面積)所代表的被測(cè)組分的量。
通過制成標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)樣的濃度與響應(yīng)值之間應(yīng)存在較好的線性關(guān)系。
外標(biāo)法在液相色譜中用的最多,其優(yōu)點(diǎn)是操作、計(jì)算簡單,是一種常用的定量方法;
無需各組分都被檢出、洗脫;需要標(biāo)樣;標(biāo)樣及未知樣品的測(cè)定條件要一致;進(jìn)樣體積要準(zhǔn)確。
然而,外標(biāo)法也有一些缺點(diǎn),如實(shí)驗(yàn)條件要求高,如檢測(cè)器的靈敏度,流速、流動(dòng)相組成的不能發(fā)生變化;
每次進(jìn)樣體積要有好的重復(fù)性。
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