高效液相色譜儀在使用中可能會(huì)遇到壓力過(guò)高的問(wèn)題。壓力突然升高,一般都是由于流路中有堵塞的原因。以下是排查和解決這類問(wèn)題的步驟:
1. 斷開(kāi)真空泵的入口處,此時(shí)PEEK管里充滿液體,使PEEK管低于溶劑瓶,看液體是否自由滴下。如果液體不滴或緩慢滴下,則是溶劑過(guò)濾頭堵塞。如果液體自由滴下,溶劑過(guò)濾頭正常,再檢查。
2. 打開(kāi)Purge閥,使流動(dòng)相不經(jīng)過(guò)柱子,如果壓力沒(méi)有明顯下降,則是過(guò)濾白頭堵塞。處理方法是將過(guò)濾白頭取出,用10%的異丙醇超聲半個(gè)小時(shí)。如果壓力降至100 PSI(6.7 Bar)以下,過(guò)濾白頭正常,再檢查。
3. 把色譜柱出口端取下,如果壓力不下降,則是柱子堵塞。處理方法是如果是緩沖鹽堵塞,則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強(qiáng)保留的物質(zhì)導(dǎo)致堵塞,則要用比現(xiàn)在流動(dòng)相更強(qiáng)的流動(dòng)相沖至壓力正常。假如按上面的方法長(zhǎng)時(shí)間沖洗壓力都不下降,則可考慮將柱子的進(jìn)出口反過(guò)來(lái)接在儀器上,用流動(dòng)相沖洗柱子。
此外,影響系統(tǒng)壓力的因素還有流動(dòng)相的溶劑組成、溫度及流速。具體來(lái)說(shuō):
1. 流動(dòng)相的粘度是產(chǎn)生反壓的主要原因。有機(jī)溶劑-水的粘度隨組成與壓力的關(guān)系圖顯示,乙腈-水比例為(20:80)、甲醇-水比例為(40:60至50:50)時(shí),系統(tǒng)的壓力最大。在做實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)盡量避開(kāi)這個(gè)比例范圍。另外,異丙醇粘度大,一般不作流動(dòng)相使用。
2. 流速對(duì)反壓的影響是線性關(guān)系,流速增加,反壓亦增大。
3. 溫度對(duì)反壓的影響是反比關(guān)系,溫度升高,反壓降低,對(duì)某些流動(dòng)相的影響更大一些。
4. 液相色譜儀各模塊之間的連接管路也會(huì)產(chǎn)生壓力,系統(tǒng)壓力與管路的長(zhǎng)度成正比,與管路直徑的四次方成反比(1/4d)。上述考慮的是柱外因素對(duì)系統(tǒng)壓力的影響,色譜柱對(duì)系統(tǒng)壓力的影響也很大,反壓與色譜柱長(zhǎng)度成正比,與填料顆粒度的平方成反比(2.5μm填料比3.5μm填料反壓高)。
以上信息僅供參考,如遇到無(wú)法解決的問(wèn)題建議聯(lián)系專業(yè)技術(shù)人員尋求幫助或咨詢液相色譜儀品牌廠商尋求解決方案。