液相色譜柱污染后,需要進行清洗和再生。以下是清洗和再生的方法:
1. 反相色譜柱的清洗:
(1)分別用甲醇、三氯甲烷、甲醇-水各20倍柱體積,使之通過柱子。然后用流動相平衡(通常仍用20倍柱體積),柱一般將恢復正常。
(2)如果選擇性仍和以前不一樣,則表明還有其他雜質(zhì)留在柱子里,這時應(yīng)考慮更加嚴格的清洗:先用20倍柱體積的水,再用相同體積0.05mol/L硫酸,最后用流動相溶劑。酸洗常能洗下有機溶劑所不能洗下的剩余雜質(zhì)。
(3)對于嚴重污染的反相柱,只能采用再生的方法。
2. 正相色譜柱的清洗:
(1)用正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲醇等溶劑做流動相,順次沖洗,每種流動相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的柱體積(異丙醇粘度大,可降低流速,避免壓力過高)。注意使用溶劑的次序不要顛倒,用甲醇沖洗完后,再以相反的次序沖洗至正己烷,所有的流動相必須嚴格脫水。
3. 離子交換色譜柱的清洗:長時間在緩沖溶液中使用和進樣,將導致色譜柱離子交換能力下降,用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。
需要注意的是,如果色譜柱污染嚴重或不確定污染程度,建議咨詢菲羅門相關(guān)技術(shù)人員或?qū)I(yè)機構(gòu)以進行更詳細的清洗和再生。