酸性pH值對(duì)反相色譜柱分離的影響主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:
1. 流動(dòng)相的pH值可以影響化合物的電離狀態(tài)。當(dāng)流動(dòng)相的pH值低于化合物的pKa時(shí),化合物會(huì)電離,增加其在流動(dòng)相中的溶解度。而當(dāng)流動(dòng)相的pH值高于化合物的pKa時(shí),化合物的質(zhì)子化會(huì)增加其疏水性,使其在反相柱上的保留增強(qiáng)。
2. 酸性pH值會(huì)影響反相色譜柱上的選擇性配體的狀態(tài),從而影響中性化合物的分離選擇性以及色譜峰的對(duì)稱性。
因此,在反相色譜過程中,可以通過調(diào)整流動(dòng)相的pH值來優(yōu)化分離效果。