HILIC模式色譜柱的原理是基于吸附色譜的分離方式,利用固定相的極性吸附作用和流動(dòng)相的洗脫作用實(shí)現(xiàn)樣品的分離。HILIC模式色譜柱的固定相通常為極性填料,如硅膠或聚合物,表面含有親水基團(tuán)和疏水基團(tuán)。流動(dòng)相則通常為高極性的有機(jī)溶劑,如甲醇、乙腈等,用于攜帶樣品通過色譜柱進(jìn)行分離。
在分離過程中,樣品中的化合物首先在流動(dòng)相和固定相之間進(jìn)行分配,極性分子首先在主體流動(dòng)相與色譜填料表面的半固定的高極性水膜之間發(fā)生液液分配。次級保留作用包括色譜填料表面硅醇基和/或極性官能團(tuán)與帶電分析物發(fā)生的離子交換作用。此外,氫鍵作用也發(fā)生在帶正電的分析物與帶負(fù)電的表面硅醇基之間。
對于HILIC模式色譜柱的維護(hù),需要注意以下幾點(diǎn):
1. 避免使用磷酸鹽等強(qiáng)酸性添加劑,以免對色譜柱造成損害。
2. 在使用前,應(yīng)進(jìn)行色譜柱的平衡和清洗,確保色譜柱在使用前已經(jīng)穩(wěn)定且清潔。
3. 在使用過程中,應(yīng)注意控制流速和流動(dòng)相的比例,避免對色譜柱造成過大的壓力或流量波動(dòng)。
4. 在使用結(jié)束后,應(yīng)對色譜柱進(jìn)行清洗和保存,避免樣品在色譜柱中殘留或產(chǎn)生污染。
總之,正確使用和維護(hù)HILIC模式色譜柱可以延長其使用壽命,提高分離效果和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。