以下是讓色譜柱保持耐用的一些建議:
1. 流速控制:不同粒徑的色譜柱有不同的最大流速,如粒徑為1.8μm的UPLC的流速常設(shè)為0.3~0.5mL/min,粒徑為5μm的HPLC分析流速不大于1.5mL/min,粒徑為10μm半制備柱流速控制在3mL/min。應(yīng)嚴(yán)格控制流速,避免流速過(guò)高導(dǎo)致色譜柱沖垮、塌陷。
2. 儀器操作:在操作實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí),應(yīng)該將流速和柱壓逐漸增加,避免流速和柱壓的瞬間升高導(dǎo)致柱床受到?jīng)_擊,產(chǎn)生空隙,影響色譜柱的使用壽命。
3. 保護(hù)柱使用:可以配置一個(gè)與所使用液相色譜柱相同填料的“保護(hù)柱”,以有效地阻攔容易損壞色譜柱的大分子和不溶性顆粒,過(guò)濾易沉著色譜柱上產(chǎn)生死吸附的物質(zhì),從而延長(zhǎng)色譜柱使用壽命。
4. 防止機(jī)械振動(dòng):應(yīng)盡量防止較強(qiáng)的機(jī)械振動(dòng),以免柱床產(chǎn)生空隙,影響柱的使用效果。
5. 避免樣品污染:避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi),需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一個(gè)保護(hù)柱。
6. 逐漸改變?nèi)軇┑慕M成:特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?br />
7. 選擇合適的流動(dòng)相:以避免固定相被破壞。
綜上所述,這些措施可以幫助延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。但是請(qǐng)注意,每種色譜柱都有其特定的使用條件和范圍,使用者應(yīng)當(dāng)熟悉并遵守相應(yīng)的使用指南。在任何情況下,如果超出色譜柱的設(shè)計(jì)能力(如流速、壓力等),都可能對(duì)色譜柱造成損害。因此,使用者應(yīng)當(dāng)根據(jù)具體情況進(jìn)行選擇和操作。