色譜柱分離是利用物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間的相互作用力差異,使待分離的物質(zhì)在色譜柱中逐漸分離出來的過程。其基本原理是根據(jù)物質(zhì)在兩種相中的不同親疏性、分配系數(shù)等屬性,利用物質(zhì)在固定相與流動(dòng)相之間的不同程度的相互作用力來實(shí)現(xiàn)分離。
常見的色譜柱包括氣相色譜柱(GC柱)和液相色譜柱(LC柱),其分離原理可分為以下幾種:
1. 吸附色譜:在固定相表面,待分離物質(zhì)與固定相發(fā)生吸附作用,即物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間交替吸附和解吸現(xiàn)象。分離依據(jù)物質(zhì)與固定相之間的吸附性質(zhì)差異。常見的吸附色譜柱有硅膠柱和活性炭柱。
2. 離子交換色譜:固定相上具有帶電位點(diǎn)的功能基團(tuán),可以與待分離物質(zhì)中帶有相反電荷的離子發(fā)生吸附和解吸作用。分離依據(jù)物質(zhì)中帶電物種與固定相中離子交換物質(zhì)的親和性差異。
3. 親水性/疏水性相互作用色譜:分離依據(jù)物質(zhì)與固定相之間的親水性或疏水性。親水性相互作用色譜柱包括正相色譜柱,反相色譜柱等;疏水性相互作用色譜柱如疏水性相互作用柱。
4. 大小排斥色譜:固定相上存在孔隙結(jié)構(gòu),物質(zhì)根據(jù)其分子大小和形狀進(jìn)入孔隙內(nèi)進(jìn)行分離。分離依據(jù)物質(zhì)與固定相孔徑大小的選擇效應(yīng)。
5. 手性分離色譜:用具有手性功能的固定相和/或手性配體識(shí)別和分離立體異構(gòu)體。分離依據(jù)物質(zhì)的手性性質(zhì)。
總的來說,色譜柱分離原理是通過物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間的相互作用差異,利用物質(zhì)在兩相中的不同特性和親疏性來實(shí)現(xiàn)物質(zhì)的分離。不同類型的色譜柱具有不同的分離機(jī)理和應(yīng)用領(lǐng)域。