App ID: FLM-T230006
方法:自訂
色譜柱:Titank HILIC 3μ 150×4.6mm(貨號:FMF-5567-EON)
流動相:10mM 磷酸二氫鉀(pH 4.3)-乙腈=(20:80)
流速:0.6ml/min
檢測波長:205nm
柱溫:45℃
方法說明:使用 Titank HILIC 色譜柱可較好分離左卡尼汀及雜質(zhì) A,注意流動相采用高比例乙腈,而磷酸鹽在高比例乙腈中易鹽析,流動相應(yīng)采用預(yù)混,不可采用在線混合。
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手性色譜柱的選擇:由于左卡尼汀為手性分子,其雜質(zhì)A也是手性的,因此需要使用手性色譜柱對其進行分離。常見的手性色譜柱有手性固定相型與手性填充劑型兩種,根據(jù)實際需要選擇合適的手性柱。
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流動相的優(yōu)化:流動相的組成及pH對于手性化合物的分離效果有很大影響。需要通過試錯法進行調(diào)整,根據(jù)試驗結(jié)果優(yōu)化流動相的成分及pH值。流動相通常由有機溶劑(如甲醇、乙腈等)和緩沖液組成。
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柱溫的控制:柱溫的升高有助于提高柱效和分離效率,但對于左卡尼汀和其雜質(zhì)A,溫度過高會導(dǎo)致兩者失活,因此需要在不影響分離效果的前提下,控制好柱溫,一般為室溫或略高于室溫。
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檢測方法的選擇:由于左卡尼汀和雜質(zhì)A在純水中不易被檢測到,因此需要選擇合適的檢測方法,如紫外檢測、熒光檢測、電化學(xué)檢測等,以提高檢測的靈敏度和準(zhǔn)確性。同時,需要確保檢測方法與色譜柱相兼容。
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樣品預(yù)處理:對于液體樣品,需要通過凈化或者液液抽提等方式來去除樣品中的雜質(zhì),使得左卡尼汀和其雜質(zhì)A的含量大致相等。對于固體樣品,需要進行適當(dāng)?shù)奶崛?、萃取或者洗脫等處理,使得樣品中的化合物含量處于相同的?shù)量級。
以上是左卡尼汀及其雜質(zhì)A的色譜分離方法的關(guān)鍵要點,實際操作過程中需要根據(jù)具體情況做出適當(dāng)調(diào)整。