Titank色譜柱對(duì)嬰幼兒配方奶粉中5種核苷酸含量測(cè)定
嬰幼兒奶粉中核苷酸的檢測(cè)
樣品制備:
精密稱取奶粉 5.0 g,加適量溫水,超聲 10 min 使溶解,加 10%醋酸溶液 5 mL,搖勻,靜置,再加水定容至 50 mL,搖勻,過濾,取上清液待用。
樣品凈化:
SPE 小柱:Polyclean X-HLB 60mg/3mL(貨號(hào):9B-P001-06030)
活化:甲醇 3 mL
平衡:水 3 mL
上樣:2 mL 待凈化液
沖洗:20%甲醇/水溶液 3 mL
合并上樣流出液與沖洗流出液,再加水定容至 5 mL,作為待測(cè)溶液。
HPLC 測(cè)定:
色譜柱:Titank C18 5μm 250×4.6mm (貨號(hào): FMG-5560-EONU)
流動(dòng)相:0.1 M K2HPO4 溶液(用磷酸調(diào)節(jié) pH 值至 5.6)為流動(dòng)相A;乙腈為流動(dòng)相B
流 速 :1 mL/min
進(jìn)樣體積:5 μL
檢測(cè)波長(zhǎng):260 nm
溫度:常溫
梯度:
時(shí)間(分鐘) |
流動(dòng)相 A(%) |
流動(dòng)相 B(%) |
0 |
100 |
0 |
8 |
100 |
0 |
25 |
95 |
5 |
27 |
75 |
25 |
40 |
75 |
25 |
5 種核苷酸混標(biāo)圖譜
Polyclean X-HLB 凈化后嬰兒配方奶粉圖譜