色譜技術(shù)是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。
對(duì)色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。
關(guān)于色譜柱的安裝、維護(hù)、保存以及由色譜柱導(dǎo)致的這樣那樣的色譜故障也是一門學(xué)問。
菲羅門糖柱的正確使用包含:加裝保護(hù)柱,過濾流動(dòng)相和樣品,凈化樣品,避免過高的柱壓,注意溫度和酸堿度,正確及時(shí)的沖洗等。
菲羅門糖柱怎樣正確沖洗?
開始試驗(yàn)前,應(yīng)了解柱中當(dāng)前是何種溶劑。對(duì)于新色譜柱,如無特殊說明均為評(píng)價(jià)報(bào)告中所用流動(dòng)相。
柱中當(dāng)前溶劑一定要與分析樣品所用流動(dòng)相互溶,如不能混溶,要用與二者均能相互混溶的第三種溶劑過渡。
異丙醇是能與各種溶劑混溶的試劑,可作為中介流動(dòng)相使用。
反相鍵合硅膠柱適宜的保存環(huán)境是純甲醇,如分析用流動(dòng)相為緩沖液2有機(jī)溶劑,可先用較低甲醇含量(<20%)的甲醇2水置換掉原來的純甲醇,再進(jìn)分析用流動(dòng)相,以防止在柱內(nèi)發(fā)生鹽的沉淀;試驗(yàn)結(jié)束后,要及時(shí)用適當(dāng)?shù)娜軇_洗系統(tǒng)并終過渡到純甲醇沖洗,對(duì)于含有緩沖鹽的流動(dòng)相,辦法是先用與分析用流動(dòng)相組成完全相同但不含緩沖鹽的溶液進(jìn)行沖洗,再逐步過渡到純甲醇沖洗。
多數(shù)沖洗液體積大約為柱容積的15~20倍,但終要以基線是否平直、壓力是否穩(wěn)定決定。有些廠家的色譜柱標(biāo)明了流動(dòng)相中有機(jī)相的較低使用濃度為≥5%,使用時(shí)應(yīng)給予注意。