菲羅門色譜柱技術(shù)指南 - 如何增加Comix色譜柱的洗脫能力?
菲羅門Comix色譜柱是可以分離大極性化合物以及具備各種疏水與極性復(fù)雜化合物的強(qiáng)大工具
菲羅門Comix色譜柱包含了多種色譜分離模式,離子交換分離作用,正相分離,反相分離還有HILIC分離
菲羅門Comix色譜柱的七種固定相
Comixshell CARP與Comixsil RP-CX
表面陰離子嵌入鍵合,提供穩(wěn)定的陽(yáng)離子交換作用,疏水作用及陰離子排阻作用
Comixshell AIRP與Comixsil RP-AX
表面陽(yáng)離子嵌入鍵合,提供穩(wěn)定的陰離子交換作用,疏水作用及陽(yáng)離子排阻作用
Comixsil RPAC
陰陽(yáng)離子同時(shí)嵌入烷基鍵合硅膠,提供穩(wěn)定的陽(yáng)離子與陰離子交換作用(陰離子與陽(yáng)離子排阻作用)
Comixsil ACRP
陰陽(yáng)離子同時(shí)嵌入烷基鍵合硅膠,提供穩(wěn)定的陰離子與陽(yáng)離子交換作用(陽(yáng)離子與陰離子排阻作用)
Comixsil HCS
表面陰離子嵌入鍵合,提供穩(wěn)定的陽(yáng)離子交換作用,表面長(zhǎng)碳鏈提供穩(wěn)定的疏水作用,特別適合強(qiáng)極性酸,以及各種單糖類分析
如何增加Comix的洗脫能力?
上一篇“Comix系列色譜柱使用說(shuō)明書”里面說(shuō)到不能超出Comix系列色譜柱的PH使用范圍,這款柱子始終保持在酸性條件里。
Comix對(duì)流動(dòng)相的濃度是敏感的,改變緩沖鹽的濃度跟酸的濃度對(duì)Comix的洗脫能力變化明顯,下面我們看幾個(gè)案例來(lái)了解一下。
從上圖能看出,當(dāng)流動(dòng)相加入的緩沖鹽的濃度越大或者加入酸的濃度越大時(shí),會(huì)增加Comix柱子的洗脫能力。
在方法開發(fā)的過(guò)程中,我們?cè)谖镔|(zhì)保留過(guò)強(qiáng)或者化合物保留不佳的情況下,可以嘗試調(diào)節(jié)流動(dòng)相中的緩沖液濃度來(lái)改變物質(zhì)的保留時(shí)間;還可以嘗試用梯度的方式先走低濃度的緩沖鹽或者酸來(lái)增強(qiáng)物質(zhì)的保留,再用高濃度的的緩沖鹽或者酸來(lái)加速?gòu)?qiáng)保留物質(zhì)的洗脫,從而達(dá)到將我們需要的化合物分離開來(lái)或保留等目的。