菲羅門Comix色譜柱的9個操作要點
良好的柱維護會花費一些時間,但是可以延長Comix 系列色譜柱的壽命。
對于Comix 系列柱來說,合適的流動相以及合適的保存條件必須注意。
色譜柱操作注意要點
1、避免使用醇類流動相應(yīng)用于Comixshell CARP, Comixsil ACRP, Comixshil RPAC, Comixsil HCS 以及Comixsil RP-CX 柱上,這可能酯化固定相,從而帶來重現(xiàn)與保留的變化。
一般情況下流動相中的有機相只用乙腈;
2、不要超出Comix 系列色譜柱的PH 范圍使用,此系列柱需要始終保存在酸性的緩沖鹽或含有機酸的體系中;
3、不能保存色譜柱在含有TEA,TFA 這種調(diào)節(jié)劑中,這會造成色譜填料表面的可能變化從而影響重現(xiàn)。在色譜運行過程中,最好使用HPLC 級的溶劑;
4、為獲得好的重現(xiàn)性,強烈推薦使用柱溫箱保持Comix 系列柱在運行過程中的溫度穩(wěn)定性。所有Comix 系列柱的溫度范圍是0 至60 攝氏度;
5、為獲得好的重現(xiàn)性,進樣前的柱平衡很重要。有時改變了色譜柱的流動相會造成平衡不充分。
Comix 系列色譜柱含有多種復(fù)合型的離子鍵合。在改變緩沖鹽體系時,需要用新的緩沖鹽體系,以50mM 的濃度平衡至少一個小時以上。如果只是改變一個流動相體系中緩沖鹽的濃度,那么用15ml 該緩沖鹽平衡即可;
6、Comix 系列柱的最高壓為5000Psi(3u 以及5u 產(chǎn)品)和10000Psi(2.7u 產(chǎn)品)。任何時候不能超過這個壓力,否則造成填料損壞和泄漏;
7、除了醇類,不限制THF 以及其它類溶劑在流動相中的添加使用;
8、一般情況下,色譜柱必須按照標簽的方向指示運行。如果有必要對色譜柱進行反沖去除篩板和柱頭污染的話,必須將流速降至0.1ml/min 進行清洗;
9、可以用PEEK 或金屬接頭連接色譜柱,但是為了最佳的無死體積匹配,建議換成PEEK 管路和PEEK 手緊接頭,以達到最好的匹配。Comix 系列柱的PH 操作范圍
Comix 系列柱的PH 操作范圍
色譜柱 |
PH 范圍/建議操作范圍 |
短期保存 |
長期保存 |
Comixshell CARP Comixsil ACRP Comixsil RP-CX Comixsil RPAC Comixsil HCS |
1.5-7.0/2-6.5 |
20mM PH=3.2 甲酸銨緩沖鹽/乙腈=25/75 |
乙腈/水/甲酸=75/25/0.1 |
Comixshell AIRP Comixsil RP-AX |
1.5-6.0/2-5.0 |
20mM PH=3.2 甲酸銨緩沖鹽/乙腈=25/75 |
乙腈/水/甲酸=75/25/0.1 |
注意!!! 在您不確定色譜柱如何平衡與保存,以及涉及具體的方法時不確定流動相配制的,請在使用前,及時與我公司技術(shù)部或工程師聯(lián)系,以確保正確的使用與維護來獲得可期的分析結(jié)果。 |