填料做為色譜技術(shù)的核心,一直是色譜研究中最豐富、最有活力、最富于創(chuàng)造性的研究方向之一。經(jīng)常使用色譜柱的您知道硅膠鍵是如何相互作用的嗎?
要搞明白這個(gè)問題,我們要先明白色譜柱的結(jié)構(gòu)。
色譜柱由接頭、螺帽、柱管、填料、墊圈及過濾片等組成,其中填料為色譜柱的核心部分,科研工作者在填料上發(fā)揮奇思妙想,開發(fā)出市面上種類繁多的色譜柱,每種色譜柱又有其獨(dú)特的選擇性及應(yīng)用。
常用的色譜柱填料基質(zhì)為硅膠,硅膠作為基質(zhì)有如下優(yōu)點(diǎn):
根據(jù) R3 基團(tuán)的不同,可將色譜柱分為不同的類型。
1、空間位阻
普通的色譜柱在 pH <2 時(shí)不穩(wěn)定,發(fā)生水解,導(dǎo)致鍵合相流失。當(dāng)我們用異丙基、二異丁基來取代甲基的話,就在鍵合相上形成一個(gè)保護(hù)層,這樣不僅能抗水解能力(pH1-8),還能防止分離化合物與硅羥基之間的作用,改善峰型。
2、極性嵌入
另外,極性嵌入可降低「脫水」( 疏水塌陷)危險(xiǎn),即使在含水量高的流動(dòng)相條件下,樣品也同樣有穩(wěn)定保留和最佳峰形。
疏水塌陷:普通的 HPLC 色譜柱在有機(jī)溶劑含量低甚至 100% 水流動(dòng)相條件下,一旦流速停止,推動(dòng)水溶液流動(dòng)相進(jìn)入硅膠孔隙的壓力減小,當(dāng)壓力降低時(shí),疏水的微孔表面排斥極性流動(dòng)相,便會(huì)發(fā)生鍵合相孔隙脫水,從而導(dǎo)致所謂的「疏水塌陷」,對(duì)化合物的保留能力大大減弱。
3、雙層表面修飾
核殼型色譜柱對(duì)儀器的柱外死體積要求高、且柱容量小于全多孔色譜填料,因而并不適用于大規(guī)模的制備液相分離需求。