HPLC和LC/MS 緩沖液選擇指南:僅關(guān)注低pH值?
如果只注重低pH值的流動相,則在pH為2時,0.1%v/v磷酸(表2)可為LC-UV應(yīng)用提供有效的緩沖。
三氟乙酸(TFA)在0.1%v / v時也能產(chǎn)生pH約等于2的流動相(表2);而且,多年以來,它一直是低pH條件下LC-MS的首選添加劑。
TFA也可作為離子對試劑,廣泛用于蛋白質(zhì)和肽類的分離。
然而,在LC-MS界面中,TFA能夠抑制電離,導(dǎo)致信號下降。
因此,近年來它已經(jīng)不再被廣泛使用了。
相反,對于低pH值,0.1%的甲酸(見表2,pH2.7)已經(jīng)成為LC-MS的首選。
對于低pH值,如果使用一種酸,則假定pH值比緩沖能力更加重要;如果需要緩沖,則可從表2中選擇涵蓋所需pH值的緩沖液。