代謝組學(xué)中的常用的液相色譜柱一般有下面幾種
代謝組學(xué)(metabonomics/metabolomics)是對(duì)生物體內(nèi)所有代謝物進(jìn)行定量分析。
主要研究的是作為各種代謝路徑的底物和產(chǎn)物的小分子代謝物(MW<1000)。
在食品安全領(lǐng)域,利用代謝組學(xué)工具發(fā)現(xiàn)農(nóng)獸藥等在動(dòng)植物體內(nèi)的相關(guān)生物標(biāo)志物也是一個(gè)熱點(diǎn)領(lǐng)域。
目前代謝組學(xué)在液相(HPLC)和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)中常用的色譜柱類型有:
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常規(guī)C18柱
這是最常見(jiàn)的液相固定相,主要依靠疏水作用保留和分離化合物。比如:
案例一、14C 人血漿和尿液中的泊馬度胺和代謝物
常規(guī)C18柱
這是最常見(jiàn)的液相固定相,主要依靠疏水作用保留和分離化合物。比如:
案例一、14C 人血漿和尿液中的泊馬度胺和代謝物
2.特色固定相C18-PFP
此為在C18末端鍵合PFP(五氟苯基)的特色固定相,可以在維持疏水性的同時(shí)增強(qiáng)極性化合物的保留,比如:
案例二、代謝組學(xué) – C6 & C7 羥基和二元羧酸
案例三、代謝組學(xué)和生化遺傳學(xué)——?;拾彼?/span>
3.特色固定相C18-Amide
此為在C18中嵌入酰胺基團(tuán)的特色固定相,可以利用酰胺鍵增強(qiáng)大極性化合物的保留,比如:
案例四、人類尿液代謝物分析
4.超惰性SuperC18
此為ACE特有的EBT技術(shù)(封裝鍵合技術(shù)),最大程度地消除殘留硅醇基的影響,特別適合維持堿性化合物的優(yōu)異色譜峰形,同時(shí)可以耐受1.5-11.5的寬pH范圍。比如:
案例五、尿液中阿片類代謝物
5.HILIC柱(HILIC-A 、HILIC -N 、HILIC-B)
針對(duì)不同酸堿性的化合物,ACE設(shè)計(jì)了三款HILIC柱(A,B和N),實(shí)現(xiàn)不同的選擇性。比如:
案例六、肌酸酐和其代謝物
6.極性親水AQ柱
針對(duì)大極性化合物,也可以使用極性嵌入或者極性封端的AQ柱,比如:
案例七、LC-MS方法分析人尿中10種嘌呤和肌酐
總結(jié):代謝組學(xué)涉及面很廣,目前沒(méi)有一款色譜柱可以解決所有的問(wèn)題。如果有條件建議配齊以上列舉色譜柱(C18、C18-PFP、C18-AMIDE、SuperC18 、HILIC-A、HILIC-B、HILIC-N和AQ)或者相類似的固定相。